尼氏染色操作流程

　　理由同上。

原理

　　尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质，广泛见于各种神经元，不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。尼氏染色法可以染出尼氏体，用来观察神经元内的细胞结构；还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况 。

步骤

　　不同老师有方法略有区别，我们以熊鲲老师的方法为例。

1. 将处理好的样本放入尼氏染色液，时间可根据切片厚度等，结合染色情况调整，一般在10分钟-30分钟左右。
2. 蒸馏水洗涤数次，每次几秒。
3. 用无水乙醇分色，每次浸入几秒拿出观察脱色情况，到变蓝或者浅紫色为止。
4. 轻磕载玻片，将水甩干，注意避免组织被甩掉，时间允许则风干。
5. 用无水乙醇脱水3分钟。
6. （水洗，并甩干）。
7. 二甲苯脱脂3-5分钟。
8. 换新鲜二甲苯再脱脂3-5分钟。
9. 封片：用棉签屁股挑去少许中性树脂到盖玻片上，手持载玻片压下去，注意避免气泡产生。如果产生，可以将气泡挤出。
10. 观察染色情况。