理由同上。
原理
尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。尼氏染色法可以染出尼氏体,用来观察神经元内的细胞结构;还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况 。
步骤
不同老师有方法略有区别,我们以熊鲲老师的方法为例。
- 将处理好的样本放入尼氏染色液,时间可根据切片厚度等,结合染色情况调整,一般在10分钟-30分钟左右。
- 蒸馏水洗涤数次,每次几秒。
- 用无水乙醇分色,每次浸入几秒拿出观察脱色情况,到变蓝或者浅紫色为止。
- 轻磕载玻片,将水甩干,注意避免组织被甩掉,时间允许则风干。
- 用无水乙醇脱水3分钟。
- (水洗,并甩干)。
- 二甲苯脱脂3-5分钟。
- 换新鲜二甲苯再脱脂3-5分钟。
- 封片:用棉签屁股挑去少许中性树脂到盖玻片上,手持载玻片压下去,注意避免气泡产生。如果产生,可以将气泡挤出。
- 观察染色情况。